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打怪神器——海狸蛋白纯化磁珠

作者:苏州海狸生物医学工程有限公司 2018-01-30T16:31 (访问量:6210)

蛋白纯化是很多研究僧经常遇到的实验,而蛋白纯化犹如打怪升级!当我们表达出目标蛋白后,需要将目标蛋白纯化出来,将杂蛋白小怪兽一个个消灭分离出去……这个过程通常需要充分的准备时间、优良的装备、熟练地打怪技能……而往往打怪效果并不理想,我们的目标蛋白也损失惨重!

事情往往在山穷水尽之时出现转机……新晋打怪神器蛋白纯化磁珠帮你无压力对抗杂蛋白,纯化蛋白一步到位!!!

磁珠纯化与传统预装柱纯化蛋白大比拼

Round 1 操作难易

磁珠纯化蛋白简化实验操作,无需高速离心和过滤操作、上样等操作,仅需要孵育、洗涤、洗脱步骤,告别操作繁琐。

Round 2 操作时间

时间是科研的高成本,传统预装柱纯化蛋白需要半天时间,而磁珠纯化蛋白仅需要小于1小时,磁珠纯化蛋白更加节省时间成本。

Round 3 所用设备

实验室实验条件有限,没有良好仪器设备是困扰很多研究僧的难题,传统预装柱纯化蛋白需要高速离心机、AKTA蛋白纯化仪这种昂贵的仪器,并且在设备的准备和维护上需要花费较多精力,而磁珠纯化蛋白仅需要混合仪、磁性分离器这种小型的实验设备即可,使蛋白纯化更加简单方便。

Round 4 纯化效果


省时、操作简便、设备简单是实验中锦上添花的条件,作为蛋白纯化实验本身来说,纯化效果才是重中之重!从图中实验数据可以看到,使用海狸磁珠法纯化蛋白获得的目标蛋白量远高于层析柱法获得的目标蛋白量。

His-tag蛋白纯化磁珠


蛋白纯化中最常见的是带有组氨酸标签的蛋白,海狸His-tag蛋白纯化磁珠可以高效、快速纯化组氨酸标签蛋白。His-tag蛋白纯化磁珠是在琼脂糖微球的内部填充磁性Fe3O4内核,在表面活化偶联上亚氨基乙二酸(IDA),然后螯合镍离子(Nickel),镍离子(Nickel)可以和蛋白中组氨酸形成配位键,将需要纯化出来的蛋白结合到磁珠上,最后通过磁性分离器分离出来。

海狸His-tag磁珠纯化蛋白效果到底怎样呢?

图A. BeaverBeads™ IDA与进口同类产品比较

图A可以看出,海狸磁珠与市场上进口产品相比,一步纯化即得到同水平高纯度的目标蛋白。一个完整的操作流程即可获得纯度达到95%以上的目标蛋白。

Figure B:Purification of pET32A-VIP8 fusion protein by BeaverbeadsTM His-tag protein purification kit. Lane

M:protein molecular mass marker; Lane 1: induced whole BL21(DE3)-Pet32a-VIP8 protein;

Lane 2: supernatant of bacterial lysate; and lane 3:purified pET-32a-VIP8 fusion protein.
Cite: Molecules 2017, 22, 1963; doi:10.3390/molecules22111963


图B 中可以看出,使用海狸his-tag标签蛋白纯化磁珠可以成功获得目的蛋白,且获得的蛋白纯度可以达到95%以上。

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