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正常对照组未摄入PTZ,模型对照组与安神助眠剂组都摄入了等量的PTZ(PTZ通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内)。安神助眠剂组在摄入PTZ前服用睡安片之类的安神助眠剂。
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我们评价斑马鱼肝脏毒性有4个指标:1.肝脏面积;2.肝脏变性程度;3. 卵黄囊吸收延迟的发生率(卵黄囊是脂肪,卵黄囊吸收与肝功能密切相关);4. 肝脏病理切片。
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经过每组30尾斑马鱼的对比实验,抗炎药组与模型对照组比较,能显著抑制中性粒细胞和巨噬细胞的聚集,能显著抑制炎症基因表达水平,能改善炎性浸润情况。本实验证实了吲哚美辛具有显著的病毒性肺炎防治作用。
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免疫毒性指标有3个:(1)应用转基因中性粒细胞绿色荧光斑马鱼,观察中性粒细胞数量;(2)应用转基因巨噬细胞绿色荧光斑马鱼,观察巨噬细胞数量(荧光强度);(3)注射红色荧光微球,巨噬细胞吞噬微球排出体外
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实验结束后,以各浓度组织器官反应及死亡情况的统计学分析结果评价药物对斑马鱼的毒性,并对典型毒性器官进行拍照。
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环特生物是中国首家斑马鱼生物技术研究开发企业,专注于药物临床前筛选与评价、化学品与健康产品安全性评价等领域的研发外包服务。
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【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,服用/注射抗炎药组尾鳍中性粒细胞数量与正常对照组相似,未出现创面中性粒细胞募集情况,且TNF-α、COX-2、IL-1β、IL-6和IL-10炎症因子
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服用/注射药物一段时间后,我们观察斑马鱼的运动行为,通过荧光染色观察中枢神经凋亡细胞,也可以利用转基因运动神经绿色荧光NBT品系斑马鱼观察外周运动神经长度。
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