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pAN52-1N质粒载体

Transformation of plasmid DNA to competent E. Coli cells

1. Thaw competent cells on ice. 20–200µL per tube
2. Add max. 1-3µL of plasmid
3. Mix very gently!
4. Incubate the tubes on ice for 30 min
5. Heat shock the cells for 45 sec to 2 min at 42°C
6. Place the tubes immediately on ice for at least 2 min
7. Add 800µL of SOC medium to each tube
8. Incubate for 1 hour at 37°C and shake vigorously
9. Spin down briefly and remove most supernatants
10. Resuspend cell pellet with the rest SOC medium in the tube by pipetting
11. Plate out the suspension on a LB agar plate containing the appropriate antibiotic. Incubate the plates overnight at 37°C

>Sequence 5721bp

1    gaattccctt    gtatctctac    acacaggctc   aaatcaataa    gaagaacggt  50

51  tcgtcttttt     cgtttatatc     ttgcatcgtc    ccaaagctat   tggcgggata   100

101 ttctgtttgc     agttggctga   cttgaagtaa    tctctgcaga    tctttcgaca    150

151 ctgaaatacg   tcgagcctgc   tccgcttgga   agcggcgagg  agcctcgtcc   200

201 tgtcacaact    accaacatgg   agtacgataa   gggccagttc   cgccagctca   250

251 ttaagagcca   gttcatgggc   gttggcatga   tggccgtcat   gcatctgtac    300

301 ttcaagtaca    ccaacgctct   tctgatccag    tcgatcatcc    gctgaaggcg  350

351 ctttcgaatc    tggttaagat    ccacgtcttc    gggaagccag  cgactggtga   400

401 cctccagcgt   ccctttaagg    ctgccaacag   ctttctcagc    cagggccagc  450

451 ccaagaccga  caaggcctcc   ctccagaacg   ccgagaagaa  ctggaggggt  500

501 ggtgtcaagg   aggagtaagc  tccttattga     agtcggagga  cggagcggtg  550

551 tcaagaggat   attcttcgac    tctgtattat     agataagatg   atgaggaatt   600

601 ggaggtagca  tagcttcatt     tggatttgct    ttccaggctg   agactctagc   650

651 ttggagcata   gagggtcctt   tggctttcaa    tattctcaag    tatctcgagt    700

701 ttgaacttat     tccctgtgaa    ccttttattc     accaatgagc   attggaatga   750

751 acatgaatct    gaggactgca  atcgccatga   ggttttcgaa    atacatccgg   800

801 atgtcgaagg   cttggggcac   ctgcgttggt    tgaatttaga    acgtggcact   850

851 attgatcatc    cgatagctct    gcaaagggcg  ttgcacaatg    caagtcaaac   900

901 gttgctagca   gttccaggtg   gaatgttatg    atgagcattg   tattaaatca    950

951 ggagatatag   catgatctct    agttagctca    ccacaaaagt   cagacggcgt  1000

1001     aaccaaaagt   cacacaacac   aagctgtaag   gatttcggca   cggctacgga  1050

1051     agacggagaa  gccaccttca   gtggactcga   gtaccattta    attctatttg     1100

1101     tgtttgatcg    agacctaata   cagcccctac   aacgaccatc   aaagtcgtat    1150

1151     agctaccagt   gaggaagtgg  actcaaatcg   acttcagcaa   catctcctgg    1200

1201     ataaacttta    agcctaaact   atacagaata   agataggtgg   agagcttata    1250

1251     ccgagctccc   aaatctgtcc    agatcatggt   tgaccggtgc   ctggatcttc    1300

1301     ctatagaatc    atccttattc     gttgacctag   ctgattctgg    agtgacccag   1350

1351     agggtcatga   cttgagccta    aaatccgccg   cctccaccat    ttgtagaaaa    1400

1401     atgtgacgaa   ctcgtgagct   ctgtacagtg   accggtgact   ctttctggca    1450

1451     tgcggagaga  cggacggacg  cagagagaag  ggctgagtaa   taagccactg   1500

1501     gccagacagc  tctggcggct   ctgaggtgca   gtggatgatt    attaatccgg    1550

1551     gaccggccgc  ccctccgccc   cgaagtggaa  aggctggtgt   gcccctcgtt    1600

1601     gaccaagaat   ctattgcatc    atcggagaat   atggagcttc   atcgaatcac   1650

1651     cggcagtaag  cgaaggagaa  tgtgaagcca   ggggtgtata   gccgtcggcg  1700

1701     aaatagcatg   ccattaacct    aggtacagaa   gtccaattgc    ttccgatctg    1750

1751     gtaaaagatt    cacgagatag   taccttctcc    gaagtaggta   gagcgagtac  1800

1801     ccggcgcgta  agctccctaa   ttggcccatc    cggcatctgt   agggcgtcca  1850

1851     aatatcgtgc    ctctcctgct    ttgcccggtg   tatgaaaccg   gaaaggccgc  1900

1901     tcaggagctg   gccagcggcg  cagaccgggaTUNEology 波长可调检测卡盒-->